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檢測(cè)器的主要性能:檢測(cè)器是液相色譜儀的三大關(guān)鍵部件之一.它的作用是把色譜洗脫液中組分的量(或濃度)轉(zhuǎn)變成電信號(hào).按其適用范圍檢測(cè)器可分為通用型和專屬型兩大類.專屬型檢測(cè)器只能檢測(cè)某些組分的某一性質(zhì),紫外檢測(cè)器,熒光檢測(cè)器屬于這一類.它們只對(duì)有紫外吸收或熒光發(fā)射的組分有響應(yīng).通用型檢測(cè)器檢測(cè)的是一般物質(zhì)具有的性質(zhì).示差折光和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器屬于這一類.
(一)紫外檢測(cè)器
紫外檢測(cè)器是液相色譜中應(yīng)用zui廣泛的檢測(cè)器.它靈敏度較高,噪音低.線性范圍寬,對(duì)流速和溫度的波動(dòng)不靈敏,還適用于制備色譜.但它只能檢測(cè)有紫外吸收的物質(zhì).而且流動(dòng)相也有一定的限制.即流動(dòng)相的截止波長(zhǎng)應(yīng)小于檢測(cè)波長(zhǎng).
紫外檢測(cè)器的工作原理是朗伯-比爾定律.
(二)熒光檢測(cè)器
熒光檢測(cè)器的靈敏度比紫外檢測(cè)器高,選擇性好,但只適合于能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)的檢測(cè),許多藥物和生命活性物質(zhì)具有天然熒光,能直接檢測(cè).通過(guò)熒光衍生化可以使本來(lái)沒(méi)有熒光的化合物轉(zhuǎn)變成熒光衍生物,從而擴(kuò)大了熒光檢測(cè)器的應(yīng)用范圍.
熒光檢測(cè)器的原理與熒光分析法相同,化合物受紫外光激發(fā)后,發(fā)射出比激發(fā)光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光,稱為熒光或發(fā)射光.
(三)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器是20世紀(jì)90年代出現(xiàn)的通用型檢測(cè)器.它適用于檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的組分,主要用于檢測(cè)糖類,脂肪酸,磷脂,維生素,氨基酸,甘油三酯及甾體等.對(duì)各物質(zhì)有幾乎相同的響應(yīng).但是,其靈敏度比較低,尤其是有紫外吸收的組分.此外,流動(dòng)相必須是揮發(fā)性的,不能含有緩沖鹽等.
其工作原理是:將色譜住流出液引入霧化器與通入的氣體混合形成均勻的微小液滴.經(jīng)過(guò)加熱的漂移管,蒸發(fā)除去流動(dòng)相,而試樣組分形成氣溶膠,然后進(jìn)入檢測(cè)室.用強(qiáng)光或激光照射氣溶膠,產(chǎn)生光散射,用光二極管檢測(cè)散射光.
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